Как да се изчисли мъртвото време в колона с течна хроматография

Автор: John Webb
Дата На Създаване: 16 Август 2021
Дата На Актуализиране: 16 Ноември 2024
Anonim
Как да се изчисли мъртвото време в колона с течна хроматография - Наука
Как да се изчисли мъртвото време в колона с течна хроматография - Наука

Съдържание

Хроматографията се използва широко в химическите лаборатории за определяне на идентичността на неизвестен компонент. Този компонент протича през опаковъчния материал на колоната и взаимодейства с частиците. Взаимодействията между частиците и компонентите в пробата се основават на привличането или разтворимостта между тях. Молекулите, които нямат взаимодействие с частиците от материала на обвивката, могат да преминават през него безпрепятствено. Времето, необходимо на молекулите да преминат от точката на инжектиране към системата в максималния пик на нереактивната молекула, е мъртвото време на колоната.

Етап 1

Подсилете неизвестната проба с малко количество съединение, което не се задържа от материала на колоната. Съединението ще премине през колоната, без да взаимодейства с опаковъчния материал в колоната.


Стъпка 2

Заредете спринцовката с приблизително 20 микролитра от пробата и поставете иглата на спринцовката в отвора за инжектиране. Заредете цикъла за проба от клапана, като изпразните спринцовката във клапана.

Стъпка 3

Включете хроматографския инструмент и стартирайте мобилната фаза. Тази фаза протича през инструмента и отвежда пробата през колоната и детектора, който завършва в контейнер за отпадъци.

Стъпка 4

Активирайте клапана, който позволява пробата да влезе в пътя на потока на течността. Това зарежда компонентите на пробата в горната част на колоната и разделянето започва.

Стъпка 5

Наблюдавайте излъчващия сигнал на детектора и идентифицирайте първия пик в хроматографа. Разликата между времето за впръскване и максимума на първия пик, представен от подсилващия компонент, е мъртвото време.

Стъпка 6

Измерете разстоянието между точката на инжектиране и максималната височина на първия пик. Умножете разстоянието по скоростта на хартията или оста, за да намерите мъртвото време.